小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應是真正的“即用”試劑盒。不需添加試劑或進行設置的試劑盒。我們的試劑盒——只需打開盒子，一切就緒。簡易實用的檢測方法大大的減小了出錯機率。

試劑盒特點如下：

1、高效、靈敏、特異的抗體；

2、定量準確穩(wěn)定的重復性和可靠性；

3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

5、節(jié)省實驗經(jīng)費。

酶聯(lián)免疫，ELISA試劑盒 酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術試劑盒。

酶聯(lián)免疫，ELISA試劑盒本公司售出產(chǎn)品提供售后服務，保證產(chǎn)品質量。凡夠買我公司ELISA檢測試劑盒可免費提供代測服務。

英文名稱：Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA kit

小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應以信譽求發(fā)展，以質量求生存）
    樣品類型（SAMPLE TYPES）： 標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清
或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
   樣品采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本?/span>
將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。 
   操作步驟：參照說明書
  靈敏度:具體請查看說明書.
  檢測范圍（RANGN）：具體請查看說明書.

小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應所需儀器及自備試劑耗材：

1.酶標儀（建議儀器使用前提前預熱）

2.精密移液器，吸頭、加樣槽

3.蒸餾水或去離子水

4.洗瓶或者自動洗板機

5.37水浴鍋或恒溫箱

6.EP管

7.無粉一次性乳膠手套

儲存條件及有效期

2-8保存，切勿冷凍，有效期6個月

開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8冰箱

2.試劑的準備:

按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

3.加樣:

在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。

6.顯色和比色

（一） 顯色

顯色是ELISA中的*一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中，加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色， 情況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深，再延長反應時間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色，顯色反應應避光進行，顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉向棕黃色。

TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺上，邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達*，隨即逐漸減弱，至2小時后即可完全消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間（12-24小時）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。