小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應
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上海滬崢生物科技有限公司
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生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應是真正的“即用”試劑盒。不需添加試劑或進行設置的試劑盒。我們的試劑盒——只需打開盒子,一切就緒。簡易實用的檢測方法大大的減小了出錯機率。
試劑盒特點如下:
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、定量準確穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
酶聯(lián)免疫,ELISA試劑盒 酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術試劑盒。
酶聯(lián)免疫,ELISA試劑盒本公司售出產(chǎn)品提供售后服務,保證產(chǎn)品質量。凡夠買我公司ELISA檢測試劑盒可免費提供代測服務。
英文名稱:Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA kit
ELISA試劑盒規(guī)格 | 48T | 96T | 保存 |
酶標包被板 | 1X48 | 1X96 | 4℃/-20℃ |
標準品 | 0.5ml X 1瓶 | 0.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
標準品稀釋液 | 1.5ml X 1瓶 | 1.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
酶標試劑 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
樣品稀釋液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
顯色劑A液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
顯色劑B液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
終止液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
25倍濃縮洗滌液 | 20ml X 1瓶 | 20ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 |
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密封袋 | 1個 | 1個 |
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說明書 | 1份 | 1份 |
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小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應以信譽求發(fā)展,以質量求生存)
樣品類型(SAMPLE TYPES): 標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清
或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本?/span>
將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
操作步驟:參照說明書
靈敏度:具體請查看說明書.
檢測范圍(RANGN):具體請查看說明書.
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒上海滬崢供應所需儀器及自備試劑耗材:
1.酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
2.精密移液器,吸頭、加樣槽
3.蒸餾水或去離子水
4.洗瓶或者自動洗板機
5.37水浴鍋或恒溫箱
6.EP管
7.無粉一次性乳膠手套
儲存條件及有效期
2-8保存,切勿冷凍,有效期6個月
開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8冰箱
2.試劑的準備:
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
3.加樣:
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
4:保溫:
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后??乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
5.洗滌:
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。
6.顯色和比色
(一) 顯色
顯色是ELISA中的*一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色, 情況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。
TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達*,隨即逐漸減弱,至2小時后即可完全消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。