邦景大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA檢測試劑盒
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產品名稱:大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:MMP-7
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,產品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
尿沉渣染色液(Sternheimer法),50ml α-(Trichloromethyl)benzyl acetate 規(guī)格:>98%,BR
尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法),100ml Z-β-Ala-OH 規(guī)格:0.98
尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法),50ml Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae 規(guī)格:>98% (HPLC),BC
精子稀釋液(計數(shù)液),100ml Z-Tyr-OMe 規(guī)格:>98%,BR
精子活體染色液(伊紅法),10ml Z-Tyr-OH 規(guī)格:0.98
精子活體染色液(伊紅-黑法),10ml Z-Thr-OH 規(guī)格:0.98
精子活體染色液(伊紅-黑法),20ml ZSTK474;ZSTK-474 規(guī)格:>98%,I型PI3K亞型抑制劑"
精子活體檢測試劑盒(低滲膨脹法),10ml Z-Ser-OH 規(guī)格:>98.5%,BR
精子活體檢測試劑盒(低滲膨脹法),20ml Z-Pyr-OH 規(guī)格:>98%,BR
5-鳥苷一磷酸二鈉鹽,100g N-Hydroxy Norfloxacin 規(guī)格:美國進口"
5-鳥苷一磷酸二鈉鹽,25g NHS-biotin 規(guī)格:>98%,BR
5-鳥苷一磷酸二鈉鹽,500g N-Glycolylneuraminic Acid 規(guī)格:美國進口
5-鳥苷一磷酸二鈉鹽,5g N-Formyl Varenicline 規(guī)格:美國進口
5-鳥苷二磷酸二鈉鹽,100mg N-Formyl Leurosine 規(guī)格:美國進口
5-鳥苷二磷酸二鈉鹽,1g Nevirapine 規(guī)格:>99%,USP30,BR
5-鳥苷二磷酸二鈉鹽,500mg Nevirapine 規(guī)格:HPLC>98%,標準品
5-鳥苷三磷酸二鈉鹽,100mg Neutral red solution(1X) 規(guī)格:Ind Grade
5-鳥苷三磷酸二鈉鹽,1g Neutral red 規(guī)格:BS
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