柱式毛發(fā)DNAout

產(chǎn)品及特點(diǎn)柱式法各種毛發(fā)和角質(zhì)DNA動(dòng)物毛發(fā)不容易降解，同時(shí)含有大量的線粒體，所以是考古研究、法醫(yī)研究和線粒體研究等領(lǐng)域的重要性實(shí)驗(yàn)材料。目前市場(chǎng)上專門用于毛發(fā)樣品 DNA 提取的產(chǎn)品很少，為此基因開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 充分的酶法降解和快速的柱式提取相結(jié)合，前者使 DNA 充分釋放，后者使雜質(zhì)充分被去除。

2. DNA 回收率一般在 0.5 ug/100 mg 左右（理論產(chǎn)率一般是 0.1-1.5 ug 之間）。

3. DNA 純度高，OD 比值一般在 1.6-1.8 之間。

4. 提取的 DNA 能夠用于電泳、酶切、雜交檢測(cè)和 PCR。

5. 適合于動(dòng)物的各種毛發(fā)。 
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝 
柱式毛發(fā) DNAout 溶液 A 80805a 50 mL 蛋白酶 K 溶液（20 mg/mL） 80911 1 mL 柱式毛發(fā) DNAout 溶液 B 80805b 15 mL（棕色瓶） 柱式毛發(fā) DNAout 溶液 C 80805c 50 mL 離心吸附柱（15 層） 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 3.0 1700603 10 mL 使用手冊(cè) 80805sc 1 份 

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存（其中蛋白酶 K 溶液需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存。溶液 B 需要常溫運(yùn)輸，4℃保存），有效期一年。

自備試劑 β-巰基乙醇、氯仿

使用方法

1. 將 30-50 mg 左右毛發(fā)充分剪碎（成芝麻大小就可以），后轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5 mL 塑料離心管中。注意：好從靠近根部的地方剪取樣品。

2. 加入 1 mL 柱式毛發(fā) DNAout 溶液 A（使用之前需取本次實(shí)驗(yàn)所需的溶液 A現(xiàn)加入自備的β-巰基乙醇，β-巰基乙醇的終濃度為 5%）和 20 uL 蛋白酶 K溶液（10 mg/mL），37℃保溫 10 小時(shí)（一般過夜保溫就可以）。注意：好讓反應(yīng)體系處于搖晃狀態(tài)，此保溫長(zhǎng)度一般可以讓毛發(fā)溶化。

3. 加入 0.3 mL 的柱式毛發(fā) DNAout 溶液 B 和 0.2 mL 的自備氯仿，振蕩器上振蕩 30 秒充分混勻。

4. 12,000 rpm 室溫離心 3 分鐘，小心將上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 塑料離心管中。

5. 在上清液中加入等體積的柱式毛發(fā) DNAout 溶液 C，上下顛倒 30 秒充分混勻。

6. 將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。每次是先將 0.7-0.8 mL 混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘，12,000 rpm 室溫 1 分鐘，棄穿透液。再把剩余的一半上柱，重復(fù)此操作。

7. 將 0.7 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

8. 將 0.3 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12,000 rpm 離心半分鐘（此步為第二次洗滌，一般可以省略）。

9. 空甩離心吸附柱半分鐘去除殘留液體。

10. 將離心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料離心管中，加入 30 uL DNA 洗脫液3.0。

11. 12,000 rpm 離心 1 分鐘，管底即為毛發(fā) DNA 溶液，可立即用于 PCR，也可長(zhǎng)期保存在－20℃。注意：由于頭發(fā)中 DNA 的含量十分少，所以電泳檢測(cè)時(shí)即使全部上樣也只能看見十分微弱的 DNA 條帶。