武漢思特進科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
植物組織原位雜交-動物組織原位雜交技術(shù)
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司主營:動植物,細菌,細胞生物實驗
原位雜交中探針的選擇
DNA探針、RNA探針和寡核苷酸探針均能通過不同的酶促分子反應(yīng)進行標(biāo)記。寡核苷酸探針的長度較短,因此避免了探針內(nèi)部退火的問題,在雜交時的滲透能力也更好,探針與靶標(biāo)的接觸這是影響原位雜交是否成功的重要因素之一。DNA探針、RNA探針在合成時需要控制探針片段長度,通常300-1000bp左右,能覆蓋到較長片段的靶核酸序列,增加檢測的靈敏度。
顯色原位雜交 (CISH)
顯色原位雜交 (CISH) 能讓您利用組織學(xué)實驗室中已經(jīng)存在的方法在組織形態(tài)學(xué)背景下獲取遺傳信息。 我們提供用于CISH分析的CISH DNA探針和關(guān)鍵試劑。
熒光原位雜交 (FISH)
多重?zé)晒庠浑s交 (FISH) 能讓您利用單一樣本同時檢測多個靶標(biāo)并直觀顯示共定位情況。 使用不同光譜的熒光基團標(biāo)記每種不同的雜交探針,這種方法能讓您在單一樣本中解析多種遺傳成分或多基因表達模式,并提供多色直觀顯示。
總的來說,隨探針濃度增加,雜交率也增加。另外,在較窄的范圍內(nèi),隨探針濃度增加,敏感性增加。依我們的經(jīng)驗,要獲得較滿意的敏感性,膜雜交中32P標(biāo)記探針與非放0射性標(biāo)記探針的用量分別為5~10 ng/ml和25~1000ng/ml,而原位雜交中,無論應(yīng)用何種標(biāo)記探針,其用量均為0.5~5.0μg/ml。探針的任何內(nèi)在物理特性均不影響其使用濃度,但受不同類型標(biāo)記物的固相支持物的非特異結(jié)合特性的影響。