液相色譜直接測定毛發(fā)中的組氨酸含量

     組氨酸是復合氨基酸，一種非必需氨基酸，具有多種生理生化功能，除了清除細胞內(nèi)氧化物和參與免疫調(diào)節(jié)，還可以緩解負氮平衡，使血細胞比溶上升等。在藥物生產(chǎn)和臨床中具有重要額地位和意義。通常測定組氨酸的檢查過程采用抽血的方法，而在實驗中微源實驗室查閱文獻資料實驗了一種利用毛發(fā)組織和液相色譜直接檢測組氨酸的檢測方法。

制備標準儲備溶液：精密稱取組氨酸標準品3mg置于容量瓶中，加0.1moL／L鹽酸溶解，稀釋至刻度后搖勻，配制為1000mg／L的標準儲備液。臨用時現(xiàn)配現(xiàn)用。另準備胱氨酸、酪氨酸標準品同組氨酸操作。

制備混合標準工作溶液：制得混合標準工作溶液I(胱氨酸25mg/L、組氨酸3mg/L、酪氨酸10mg/L)、Ⅱ(胱氨酸125mg/L、組氨酸15mg/L、酪氨酸mg/L、Ⅲ(胱氨酸250mg/L、組氨酸30mg/L、酪氨酸100mg/L)、Ⅳ(胱氨酸375mg／L、組氨酸45mg／L、酪氨酸150mg/L)，

取用動物毛發(fā)，用l％的洗潔精超聲振蕩重復洗滌3次后，超純水將毛發(fā)樣品漂洗干凈，儀器干燥后剪刀剪碎，稱取洗凈剪碎后的毛發(fā)樣品100mg（精確到0.01mg），置于不銹鋼水熱合成反應釜中，加入6moL／L的鹽酸5mL，高溫水解后滴取水解液2mL，用20moL／L氫氧化鈉調(diào)至pH=2.0，經(jīng)0.25μm微孔濾膜過濾至10mL容量瓶中，用水稀釋至刻度后搖勻作為供試品溶液。色譜條件設置如下：

量取混合標準工作溶液I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V與供試品溶液各100μL進行液相色譜分析，得到色譜圖如下（1-胱氨酸、2-組氨酸、3-酪氨酸）。以組氨酸的質(zhì)量濃度(x，mg／L)為橫坐標，對應的峰面積(y)為縱坐標繪制標準曲線。

      按照標準曲線法以峰面積計算供試品中組氨酸的濃度。相關系數(shù)為0.9996，線性關系良好且穩(wěn)定性佳。直接利用HPLC分析方法檢測組氨酸含量的方法簡便快 捷，結果準確，且避免了復雜的衍生化操作以及昂貴儀器的損耗，可以作為批量組氨酸測試的檢測方式。

公司介紹：

       微源檢測，是集研發(fā)分析測試服務、藥物質(zhì)量研究、基因毒雜質(zhì)研究、元素雜質(zhì)研究、結構確認、生物藥分析服務等一體，面向全球的獨立第三方生物醫(yī)藥研發(fā)測試服務公司。

由國內(nèi)領先的科學服務企業(yè)上海泰坦科技股份有限公司（簡稱：泰坦科技）參股成立，秉承“讓檢測精準又高效”的價值觀：

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