北京普利萊基因技術(shù)有限公司
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主營產(chǎn)品: 科研試劑, elisa試劑盒, 染色液, 抗體試劑, 免疫學(xué)檢測服務(wù), 特殊染色服務(wù), 核酸檢測服務(wù), 生化測定服務(wù), ELISA試劑盒定制化服務(wù), 抗體定制化服務(wù), 緩沖液定制化服務(wù)
普利萊-Super-ECL-Plus超敏發(fā)光液
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¥150.00
≥25
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Super ECL Plus超敏發(fā)光液 (機(jī)器兼用)P1050 p1060
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
P1050-25 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強(qiáng)) | 25mL | 190元 |
P1050-100 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強(qiáng)) | 100mL | 590元 |
P1050-250 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強(qiáng)) | 250mL | 990元 |
P1050-500 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強(qiáng)) | 500mL | 1560元 |
描述:SuperECL Plus超敏發(fā)光液可用于直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。這一獨(dú)特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前最靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑,具有極高靈敏度和高信噪比,更加節(jié)省抗體用量,可檢測10-100 fg抗原,適于各類全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng);其發(fā)光迅速,熒光可持續(xù)長達(dá)12小時(shí)以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測。同時(shí)該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù),極其節(jié)省抗體。
用途:適于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的HRP標(biāo)記抗體的Western Blot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。
儲(chǔ)存:4 oC密封避光保存九個(gè)月。
安全性:無特殊毒性,按普通化學(xué)品處理。
使用方法:
1. 常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交,洗膜。
2. 洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗時(shí),配制新鮮發(fā)光工作液:分別取等體積的溶液A和B混合,放置使之升到室溫否則會(huì)減弱熒光強(qiáng)度。建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低。
3. 用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜)充分接觸。準(zhǔn)備立即使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。孵育時(shí)間過長不會(huì)增加靈敏度,有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng),使用過少的發(fā)光工作液不利于反應(yīng)進(jìn)行,也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均,明顯降低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。
4. 用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。
5. 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。
注意事項(xiàng):
1. 步驟1-5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時(shí)間過久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 蛋白過量,將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。
3. 發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。肉眼不可見的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時(shí)并使全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光。
4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏,強(qiáng)烈推薦大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為一抗1:1000-1:4000,二抗1:2000-1:5000??贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導(dǎo)致失敗!
5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)淬滅熒光,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜,例如“克林萊”牌子保鮮膜。
6. 使用肉眼可見的熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準(zhǔn)確位置和大小。
7. NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3,如必需使用勿超過0.01%。
發(fā)表英文論文時(shí)可供參考的試劑材料書寫方式:
SuperEnhanced chemiluminescence detection reagents were purchased from Applygen Technologies Inc. (Beijing, China);
The protein bands were visualized by enhanced chemiluminescence detection reagents (Applygen Technologies Inc., Beijing, China);
The blots were washed and then developed by use of a SuperEnhanced chemiluminescence detection kit (Applygen Technologies Inc., Beijing, China), The protein bands were visualized after exposure of the membranes to Kodak X-ray film.
發(fā)表中文論文時(shí)可標(biāo)明 (SuperECL Plus超敏發(fā)光液購自北京普利萊基因技術(shù)公司)。
以下僅僅列舉數(shù)篇使用北京普利萊基因技術(shù)公司SuperECL Plus超敏發(fā)光液的SCI研究論文:
1. Xia R, Wang J, Liu C, et al. The Plant Cell, 2006, 18: 85-103.
2. He J, Jiang H, Tansey JT, et al. Biochimica Biophysica Acta 2006, 1761: 247-255.
3. Zhang L, Chen J, Ke Y, et al. Oncology Reports, 2005, 14: 1615-1619.
4. Wang H, Qian H, Yu J, et al. Cancer Biology & Therapy 2006, 5: 380-385.
5. Luo M, Shen X, Zhang Y, et al. Cancer Research, 2006, 66: 11690-11699.
6. Jiang H, He J, Tang C, et al. Biochimica Biophysica Acta, 2007, 1771: 66–74
7. Ren T, He J, Jiang H, et al. Journal of Molecular Endocrinology. 2006, 37: 175-183.
8. Qian L, Zhang Z, Shi M, et al. Journal Histochemistry and Cell Biology. 2006, 126: 593-601
9. Pan S, Jiang W, Wu Y, et al. Journal Basic Research in Cardiology. 2006, 101: 193-203
10. Wang C and Liu T. Functional Plant Biology, 2006, 33: 697-702.
11. Du X, Hu H, Lin D, et al. Journal of Molecular Medcine, 2007, online, DOI 10.1007/s00109-007-0159-4