Super ECL Plus超敏發(fā)光液 （機(jī)器兼用）P1050  p1060

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	價(jià)格
P1050-25	Super ECL Plus超敏發(fā)光液（強(qiáng)）	25mL	190元
P1050-100	Super ECL Plus超敏發(fā)光液（強(qiáng)）	100mL	590元
P1050-250	Super ECL Plus超敏發(fā)光液（強(qiáng)）	250mL	990元
P1050-500	Super ECL Plus超敏發(fā)光液（強(qiáng)）	500mL	1560元

 

描述：SuperECL Plus超敏發(fā)光液可用于直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。這一獨(dú)特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前最靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑，具有極高靈敏度和高信噪比，更加節(jié)省抗體用量，可檢測10-100 fg抗原，適于各類全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)；其發(fā)光迅速，熒光可持續(xù)長達(dá)12小時(shí)以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測。同時(shí)該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù)，極其節(jié)省抗體。

 

用途：適于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的HRP標(biāo)記抗體的Western Blot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。

儲(chǔ)存：4 ^oC密封避光保存九個(gè)月。

 

安全性：無特殊毒性，按普通化學(xué)品處理。

 

使用方法:

1.     常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交，洗膜。

2.     洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗時(shí)，配制新鮮發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之升到室溫否則會(huì)減弱熒光強(qiáng)度。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低。

3.     用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm²膜)充分接觸。準(zhǔn)備立即使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。孵育時(shí)間過長不會(huì)增加靈敏度，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過少的發(fā)光工作液不利于反應(yīng)進(jìn)行，也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均，明顯降低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4.     用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。

5.     全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。

 

注意事項(xiàng)：

1.     步驟1-5可在日光燈下操作；但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時(shí)間過久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2.     蛋白過量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。

3.     發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。肉眼不可見的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時(shí)并使全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光。

4.     由于超敏發(fā)光液極其靈敏，強(qiáng)烈推薦大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為一抗1:1000-1:4000，二抗1:2000-1:5000?？贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶，導(dǎo)致失敗!

5.     某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜，例如“克林萊”牌子保鮮膜。

6.     使用肉眼可見的熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準(zhǔn)確位置和大小。

7.     NaN₃能抑制HRP活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3，如必需使用勿超過0.01%。

 

 

發(fā)表英文論文時(shí)可供參考的試劑材料書寫方式：

SuperEnhanced chemiluminescence detection reagents were purchased from Applygen Technologies Inc. (Beijing, China)；

The protein bands were visualized by enhanced chemiluminescence detection reagents (Applygen Technologies Inc., Beijing, China)；

The blots were washed and then developed by use of a SuperEnhanced chemiluminescence detection kit (Applygen Technologies Inc., Beijing, China), The protein bands were visualized after exposure of the membranes to Kodak X-ray film.

發(fā)表中文論文時(shí)可標(biāo)明 (SuperECL Plus超敏發(fā)光液購自北京普利萊基因技術(shù)公司)。

以下僅僅列舉數(shù)篇使用北京普利萊基因技術(shù)公司SuperECL Plus超敏發(fā)光液的SCI研究論文：
1. Xia R, Wang J, Liu C, et al. The Plant Cell, 2006, 18: 85-103.
2. He J, Jiang H, Tansey JT, et al. Biochimica Biophysica Acta 2006, 1761: 247-255.
3. Zhang L, Chen J, Ke Y, et al. Oncology Reports, 2005, 14: 1615-1619.
4. Wang H, Qian H, Yu J, et al. Cancer Biology & Therapy 2006, 5: 380-385.
5. Luo M, Shen X, Zhang Y, et al. Cancer Research, 2006, 66: 11690-11699.
6. Jiang H, He J, Tang C, et al. Biochimica Biophysica Acta, 2007, 1771: 66–74
7. Ren T, He J, Jiang H, et al. Journal of Molecular Endocrinology. 2006, 37: 175-183.
8. Qian L, Zhang Z, Shi M, et al. Journal Histochemistry and Cell Biology. 2006, 126: 593-601
9. Pan S, Jiang W, Wu Y, et al. Journal Basic Research in Cardiology. 2006, 101: 193-203
10. Wang C and Liu T. Functional Plant Biology, 2006, 33: 697-702.
11. Du X, Hu H, Lin D, et al. Journal of Molecular Medcine, 2007, online, DOI 10.1007/s00109-007-0159-4