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主營產(chǎn)品: 科研試劑, elisa試劑盒, 染色液, 抗體試劑, 免疫學(xué)檢測服務(wù), 特殊染色服務(wù), 核酸檢測服務(wù), 生化測定服務(wù), ELISA試劑盒定制化服務(wù), 抗體定制化服務(wù), 緩沖液定制化服務(wù)
普利萊-BCIP-NBT底物顯色試劑盒-B1066
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BCIP-NBT底物顯色試劑盒 B1066
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
B1066 | BCIP-NBT底物顯色試劑盒 | 100ml | 490元 |
儲(chǔ)存:-20°C避光
有效期:半年
描述: BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的藍(lán)紫色的NBT-formazan 。
適用:
免疫組化實(shí)驗(yàn),包括細(xì)胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色;
Western,Northern, Southern雜交等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測;
細(xì)胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。
組成:
1x堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 150mL (2瓶)
BCIP溶液(25X) 5mL
NBT溶液(25X) 5mL
使用說明:
1. 對于組織切片、細(xì)胞樣品或膜而言,在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3次,每次5-10分鐘。對于檢測內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也用適當(dāng)洗滌液洗滌3次,每次5-10分鐘。
2. 40uL NBT溶液(25X)與1ml 1x堿性磷酸酯酶顯色緩沖液混勻,再加入40ul BCIP溶液(25X)混勻,配置成反應(yīng)工作液,最好現(xiàn)用現(xiàn)配。
3. 把經(jīng)過洗滌后的NC膜或PVDF膜或其他樣本浸入反應(yīng)工作液,在確保能夠充分覆蓋樣本。
4. 室溫平緩搖動(dòng)孵育,細(xì)心觀察反應(yīng)過程,當(dāng)?shù)鞍讞l帶的顏色深度達(dá)到要求(一般約20-30 分鐘)時(shí),把膜浸入蒸餾水中停止反應(yīng)(注意:若信號(hào)太弱可增加反應(yīng)時(shí)間)。
注意事項(xiàng):
1. BCIP對人體有刺激性,NBT對人體有害,請戴手套操作,注意防護(hù)。
2. 可根據(jù)樣本的量按照比例適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)工作液體積。
3. 顯色須在嚴(yán)密觀察下進(jìn)行;時(shí)間可根據(jù)顯色情況調(diào)整,過長則造成顯色過度,出現(xiàn)非特異染色,干擾結(jié)果判斷或出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
4. 顯色過深的常見原因: 封閉不佳;抗體濃度過高;洗滌不充分;顯色時(shí)間過長。
5. 顯色過淺的常見原因:目的蛋白含量過少;抗體種類不合適或抗體濃度過低;顯色時(shí)間不夠;
6. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床治療、食品等用途。
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