蛋白酶K

英文名：Pro teinase K

別名：Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K

產(chǎn)品名稱：蛋白酶K

CAS 登錄號(hào)：39450-01-6

EINECS 登錄號(hào)：254-457-8

活性：>30U/mg

白色或類白色粉末，是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶，來源于白色念球菌(. Tritirachium album. )，具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活，反而增強(qiáng)和穩(wěn)定酶活性，并在較廣的PH范圍內(nèi)（PH4-12.5）均有活性。在組織或細(xì)胞核酸分離時(shí)，使核酸酶（RNA和DNA）以及反應(yīng)中其他酶失活

蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，從布氏白僵菌（Beauveria bassiana）中純化得到，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn)，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機(jī)理并無直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去ca2+，由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也較為穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。

規(guī)格：100毫克普通裝或客戶定制

比活性值：38 U蛋白

來源種屬：酵母菌

分子質(zhì)量：28,650

（二）、產(chǎn)品檢測報(bào)告

1、稀釋緩沖液

根據(jù)需要，利用20mM Tris-HCL 緩沖液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作濃度。

2、質(zhì)量說明

活性單位定義

37℃、PH7.5條件下，每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定義為一個(gè)單位。

脫氧核糖核酸酶殘留

以λDNA為底物，37℃消化4小時(shí)以上，未檢測到脫氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶殘留

37℃消化12小時(shí)以上，未檢測到核糖核酸酶活性。

3、酶純度測定（SDS-PAGE）

結(jié)果：蛋白酶K純度超過99.2%。

4、酶活性測定

蛋白酶K比活性值

比活性值（U）38

5、酶穩(wěn)定性測定（-20℃冷凍條件下，12個(gè)月的數(shù)據(jù)）

結(jié)果：干粉狀態(tài)正確儲(chǔ)存，一年內(nèi)酶活性保持不變；溶解狀態(tài)酶活性一年內(nèi)降低小于2%。

1、’動(dòng)物基因組提取（蛋白酶K濃度為20mg/ml）

不影響動(dòng)物基因組的有效提取√

與不加蛋白酶K的樣品相比，能有效降解蛋白質(zhì)√

2、降解蛋白質(zhì)能力

與15ug BSA 37℃孵育1小時(shí)，BSA可有效降解√

（四）、應(yīng)用范圍

  蛋白酶K的用途廣泛，主要的應(yīng)用行業(yè)包括：醫(yī)療及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域：基因診斷試劑盒；基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶；此外，還應(yīng)用于：皮革工業(yè)（皮革軟化及精細(xì)化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠）制備脈沖電泳的染色體DNA；提取組織中非蛋白成分時(shí)，降解含有蛋白質(zhì)雜質(zhì)；食品、釀造工業(yè)：肉類嫩化、酒類澄清；洗滌工業(yè)：酶洗衣粉、洗衣液等也有應(yīng)用。

（五）、貯存和使用

  干粉條件下有效期為24個(gè)月，液態(tài)時(shí)-20℃保存12個(gè)月?？蛻衾镁彌_液溶解后，需要-20℃貯存。溶解后，分裝成若干份，方便使用，避免反復(fù)凍溶。如果需要在2-8℃環(huán)境下放置，超過三天，建議過濾除菌或加入抑菌劑如3%疊danhuana，防止微生物污染。

  孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí)；理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。

三、產(chǎn)品優(yōu)勢

  蛋白酶K，是一種來源于新發(fā)現(xiàn)的真菌蛋白酶K基因，經(jīng)優(yōu)化后異源重組表達(dá)得到的切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于該蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而被廣泛應(yīng)用于制備脈沖電泳的染色體DNA、蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。

  嚴(yán)格的對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究表明，本公司產(chǎn)品蛋白酶K與現(xiàn)有市場上林伯氏白色念球菌來源的蛋白酶K產(chǎn)品相比，對(duì)大片段蛋白質(zhì)的切割能力基本相同，而在小片段蛋白質(zhì)的降解能力方面較其他產(chǎn)品活力高出50%以上。

  通過工藝優(yōu)化及單因素實(shí)驗(yàn)分析，優(yōu)化調(diào)整培養(yǎng)基配方；采用先進(jìn)的節(jié)能設(shè)備，降低能耗、降低生產(chǎn)成本。

四、產(chǎn)品市場前景分析

  由于蛋白酶K優(yōu)良的蛋白水解能力和特性，除了在生物科學(xué)研究方面，其在食品加工、飼料生產(chǎn)、環(huán)境保護(hù)、醫(yī)藥工業(yè)、能源和資源開發(fā)等各個(gè)領(lǐng)域都有快速增加的需求。蛋白酶K 的廣泛應(yīng)用范圍讓我們看到了未來市場對(duì)蛋白酶K 的迫切需求，因此，在生物醫(yī)藥等市場迫切需求和發(fā)展趨勢的前提下，結(jié)合自身資源配置能力，未來的發(fā)展，一是繼續(xù)研究蛋白酶K的分子結(jié)構(gòu)與功能的相互關(guān)系，采用多種高通量技術(shù)進(jìn)化分子結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步提高酶催化特性；另一方面，提高蛋白酶K的重組表達(dá)技術(shù)，大幅度提高生產(chǎn)水平和降低生產(chǎn)成本，滿足該重要酶在食品和飼料加工過程中的不斷增加的迫切需求。

  中國市場表現(xiàn)與西方市場有較大差異，除淀粉糖化酶、堿性蛋白酶外，其他酶種目前消費(fèi)很少，但隨著酶工程技術(shù)的研究開發(fā)，燃料乙醇、生物柴油等生物能源、生物環(huán)保、生物制造等領(lǐng)域，酶制劑有著廣泛的應(yīng)用。國民經(jīng)濟(jì)中占據(jù)重要地位但原料和能源消耗大、環(huán)境污染嚴(yán)重的造紙、紡織、制藥、飼料等行業(yè)，酶制劑的應(yīng)用也在擴(kuò)大，未來市場前景一片大好。