博爾森-BIOESN 人趨化因子C-C-基元受體4(CCR4) ELISA Kit BES0941K
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博爾森-BIOESN-人趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)-ELISA-Kit

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上海博爾森生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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品牌 博爾森-BIOESN
規(guī)格 96T/48T
貨號 BES0941K
周期 一周左右
檢測方法 sandwich
檢測范圍 0.156-10ng/mL
種屬 Homo sapiens human
商品介紹

人趨化因子C-C-基元受體4(CCR4) ELISA Kit 

檢測原理:

博爾森生物BIOESN生產(chǎn)的ELISA試劑盒采用抗體夾心法:將抗某蛋白抗體包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的某蛋白與抗體結(jié)合,加入生物素化的抗某蛋白抗體,再加入SABC復(fù)合物與生物素抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,然后加入TMB顯色底物,顯色劑顯藍(lán)色,最后加終止液變黃色,游離的成分被洗去。在450 nm處測OD值,某蛋白濃度與OD值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出標(biāo)本中某蛋白的濃度。

試劑盒組分: (保存溫度4℃)

名     

規(guī)格(48 T

規(guī)格(96 T

預(yù)包被酶標(biāo)板

8×6

8×12

標(biāo)準(zhǔn)品

1支

1支

標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液

10ml

15ml

生物素化檢測抗體(100×

60ul

120ul

生物素化檢測抗體稀釋液

6ml

12ml

SABC復(fù)合物

6ml

12ml

TMB顯色液(A/B

3ml

6ml

終止液

6ml

12ml

20×濃縮洗滌液 

30ml

60ml

封板膠紙

2張

4張

產(chǎn)品說明書

1

1

本試劑盒用于血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及其它生物體液。


標(biāo)本收集與試劑準(zhǔn)備: 

1. 血清、血漿樣本收集應(yīng)使用一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝均可),血清、血漿避免使用溶血,高血脂標(biāo)本,標(biāo)本懸浮物應(yīng)離心去除,使標(biāo)本清澈透明。待測樣本應(yīng)盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20-80℃)保存,避免反復(fù)凍融。

2. 洗滌液配置:用蒸餾水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的蒸餾水

3. 標(biāo)準(zhǔn)品配制:取71.5ml離心管,分別標(biāo)注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。從七管中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液200ul。在第一管中加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul,置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第六管中吸出200ul棄去,七管為空白對照

4. 

5. 生物素化抗體工作液配置:使用前20分鐘,用生物素化抗體稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成工作液,根據(jù)所需用量配置,當(dāng)日使用,剩余棄之。

6. TMB顯色液的配置:使用前10分鐘,將TMB顯色液A液和B液1:1混合,避光放置備用。

7. 如果您檢測的樣本中靶蛋白濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值,建議重新檢測,請根據(jù)實際情況,適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

檢測程序:

1. 加樣:空白孔加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液,其余孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品50ul,將反應(yīng)板混勻后置37℃,40分鐘。

2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,每孔加入洗液350μl,每次震蕩/浸泡1-2分鐘,向濾紙上印干。

3. 空白孔加入100ul生物素化抗體稀釋液,其余孔各加入的生物素化抗體工作液100ul混勻后置37℃,30分鐘。

4. 洗板:同上。

5. 每孔加入SABC復(fù)合物工作液100ul,混勻后置37℃,20分鐘。

6. 洗板:同上。

7. 每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul,混勻后37 ℃暗處反應(yīng)10-20分鐘(具體顯色時間根據(jù)顯色結(jié)果而定)。

8. 每孔加入100ul終止液,混勻,30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。

結(jié)果判斷與計算:

1. 所有OD值建議減除空白值后再行計算,如空白OD低于0.1,也可以直接計算。

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),OD值作縱坐標(biāo),手工繪制或用軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品OD值計算出相應(yīng)含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可

試劑盒性能:

1、 檢測范圍:1.56-100ng/mL

2、 特異性:同時可檢測重組或天然的某種蛋白或抗體,不與其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3、 重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均小于10%。

注意事項

1. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,每次檢測都應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 洗滌過程很關(guān)鍵,洗滌不充分將導(dǎo)致精確度誤差及OD值錯誤地升高,從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能 有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,37℃水浴使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。

3. 檢測時所有試劑都要恢復(fù)到室溫,板條開封后剩余板條封好,放回袋中個月內(nèi)用完。

4. 試劑盒使用超敏TMB溶液,若顯色過深會出現(xiàn)絮狀物,屬正?,F(xiàn)象,不影響結(jié)果判讀

5. 僅用于科研,不能用于臨床診斷!

聯(lián)系方式
公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 (QQ:3597200582)
電話 憧憬憩-憫憥憫憦憩憦憦憥
手機(jī) 憩憭憩憫憫憧憫憩憩憤憬
網(wǎng)址 https://www.bioesn.net/
地址 上海市松江區(qū)
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